Скрининг белка Бенс-Джонса с применением иммунофиксации в разовой порции мочи, количественное исследование в Буденновске

Подготовка к исследованию

Перед сбором мочи провести тщательный туалет наружных половых органов. Женщинам не следует собирать материал во время менструации. Накануне исследования не рекомендуется употреблять в пищу овощи и фрукты, которые могут изменить цвет мочи (свекла, морковь, черника и др.), по возможности не принимать ряд медикаментов (диуретики, витамины группы В, фурагин, аспирин).

Описание

Белок Бенс-Джонса представляет собой группу моноклональных свободных легких цепей иммуноглобулинов, которые можно обнаружить в моче или крови. Это явление характерно для лимфопролиферативных заболеваний, таких как множественная миелома. Английский врач Генри Бенс-Джонс первым описал этот белок, исследуя образец мочи, что и привело к его названию. Белок Бенс-Джонс представляет собой гомогенную группу свободных легких цепей иммуноглобулинов, которые синтезируются одной плазматической клеткой (моноклональные). Этот белок может быть представлен в виде мономеров, димеров, тетрамеров и других полимерных структур, состоящих из легких цепей иммуноглобулинов.
Свободные легкие цепи иммуноглобулинов – это полипептиды с молекулярной массой 22 кДа, которые синтезируются плазматическими клетками. Они соединяются с тяжелыми цепями и образуют молекулы иммуноглобулинов различных классов: IgG, IgM, IgA и других. В зависимости от строения константного домена различают два класса легких цепей – лямбда (λ) и каппа (κ) цепи. Каждый иммуноглобулин может содержать только один класс легких цепей – либо лямбда, либо каппа. В норме плазматические клетки синтезируют больше легких, чем тяжелых цепей. Легкие цепи, не включенные в состав иммуноглобулинов, называются свободными. Свободные каппа-цепи, как правило, присутствуют в виде мономеров и имеют маленький размер, что облегчает их фильтрацию в первичной моче. Лямбда-цепи, напротив, часто существуют в виде димеров, что затрудняет их прохождение через почечные клубочки. В редких случаях как каппа-, так и лямбда-цепи могут образовывать тетрамеры – крупные белковые комплексы, которые не фильтруются в мочевом фильтре почечных клубочков. В норме практически все легкие цепи, попавшие в почечные канальцы, подвергаются реабсорбции, и лишь их небольшая часть выводится с мочой (не более 0,75-1,8 мг/л). Появление избытка свободных легких цепей иммуноглобулинов в моче (белок Бенс-Джонса) может свидетельствовать о чрезмерной продукции плазматическими клетками (гаммапатия) или о нарушении процесса реабсорбции в почках (заболевания почек). Обнаружение белка Бенс-Джонса может использоваться для диагностики и контроля лечения этих заболеваний.
Белок Бенс-Джонса определяется у 50-70% пациентов с множественной миеломой, 30-40% пациентов с макроглобулинемией Вальденстрема и у 90% пациентов с первичным амилоидозом. Другими состояниями, при которых может обнаруживаться белок Бенс-Джонса в моче, являются лимфома, лейкоз (чаще хронический лимфолейкоз или плазмаклеточный лейкоз), рак поджелудочной железы, медуллярная карцинома щитовидной железы и доброкачественная гаммапатия неясного генеза. В случае отсутствия явных причин появления этого белка в моче говорят об идиопатической протеинурии Бенс-Джонса.
Свободные легкие цепи иммуноглобулинов нельзя определить с помощью обычного анализа мочи – для этого применяются специализированные тесты. Как правило, лабораторная диагностика при подозрении на гаммапатию начинается с электрофореза белков плазмы и мочи. Этот этап необходим для оценки концентрации М-белка (парапротеина) и начальной дифференциальной диагностики гаммапатий. Однако электрофорез является недостаточно чувствительным методом. По этой причине на следующем этапе рекомендуется проводить более чувствительный тест – иммунофиксацию белков мочи. Этот метод позволяет идентифицировать белки на электрофореграмме без утраты четкости и наглядности классической электрофоретической картины. После предварительного отмыва несвязанных белков солевым раствором пластины окрашивают, чтобы уточнить зону миграции белка и сопоставить положение образовавшегося преципитата с контрольной электрофореграммой.
Основными преимуществами метода иммунофиксации являются высокая специфичность и разрешающая способность, а также высокая чувствительность, обусловленная накоплением антител в зоне градиента при образовании специфического преципитата и минимальной диффузией антигена в процессе реакции с антисывороткой. Метод иммунофиксации позволяет выявить даже следовые М-градиенты, которые не видны на окрашенной электрофореграмме. Основная сложность метода заключается в правильном подборе разведения образца для получения плотного, хорошо видимого преципитата. Недостаточное разведение образца может привести к растворению преципитата из-за избытка антигена, а слишком большое – к невозможности его обнаружения.
Белок Бенс-Джонса может и не определяться в моче на ранних стадиях заболевания, когда избыток свободных легких цепей еще может реабсорбироваться почечными канальцами, или в случае образования свободных легких цепей тетрамеров, которые не проходят через почечные клубочки.

Показания к назначению

• При подозрении на злокачественное гематологическое заболевание;
• При необходимости проведения дифференциальной диагностики между множественной миеломой, остеопорозом, метастазами в кости и другими состояниями, сопровождающимися множественными переломами и болями в костях.

Интерферирующие факторы

Аутоиммунные заболевания (СКВ или ревматоидный артрит), прием аспирина и пенициллина в высоких дозах.

Причины отклонения показателей от нормы (повышенные значения)

Амилоидоз, возникающий без предшествующих заболеваний, моноклональная гаммапатия с неопределенным происхождением, криоглобулинемия, фанкониевский синдром, гиперпаратиреоидизм, множественная миелома, рахитоподобный синдром, макроглобулинемия Вальденстрема, медуллярный рак щитовидной железы, аденокарцинома поджелудочной железы, лимфатическая опухоль, лейкоз, идиопатическая протеинурия Бенс-Джонса.

Причины отклонения показателей от нормы (сниженные значения)

Норма, эффективное лечение заболевания.

Метод:

Электрофорез; Иммунофиксация;

Анализатор:

Автоматический анализатор для клинического электрофореза Interlab G26, Interlab S.r.l., Италия;