Комплексное обследование при бесплодии у женщин (инактивация Х хромосомы, CAG-повторы в гене AR и определение предэкспансии в гене FMR1) в Альметьевске

Подготовка к исследованию

Специальной подготовки пациента не требуется. Кровь сдается натощак.

Описание

Бесплодие у женщин может быть вызвано широким спектром причин, к которым относятся инфекции, передающиеся половым путем, хронические воспалительные процессы придатков и матки, синдром поликистозных яичников (СПКЯ), миома матки, эндометриоз, эндокринные заболевания, генетические аберрации и др.

К генетическим аберрациям, вызывающим эндокринные нарушения и возможное развитие бесплодия у женщин относятся неслучайная инактивация Х-хромосомы,  повышение количества CAG-повторов в гене андрогенового рецептора (AR), увеличение количества CGG-повторов в промоутере гена FMR1.

Исследование инактивации Х-хромосомы. В норме у женщины в клетках содержится две Х-хромосомы. На ранней стадии развития у эмбрионов женского пола в каждой клетке случайным образом инактивируется одна из них. Инактивация одной Х-хромосомы у женщин происходит для того, чтобы с двух копий не образовывалось вдвое больше продуктов соответствующих генов. Такой процесс называется дозовая компенсацией генов или лайонизация. В результате этого процесса происходит формирование мозаицизма, при котором приблизительно в половине клеток активна Х-хромосома, унаследованная от отца, а в другой половине клеток - унаследованная от матери. В норме выбор Х-хромосомы, которая будет инактивирована в каждой клетке, случаен. Однако в некоторых ситуациях наблюдается так называемая неслучайная инактивация Х-хромосомы. Это состояние, когда в большинстве клеток преимущественно инактивирована одна и та же Х-хромосома. Наличие неслучайной инактивации может свидетельствовать о минимальных перестройках в одной из Х-хромосом. Было показано, что «неслучайная» инактивация Х-хромосомы имеется у 50% женщин с синдромом поликистоза яичников (СПКЯ), а также встречается при других нарушениях репродуктивной функции.

Исследование количества CAG-повторов в гене андрогенового рецептора (AR). Ген АR локализуется на Х-хромосоме в относительной близости с областью ее инактивации. Число CAG-повторов в первом экзоне в норме варьирует от 8 до 35 . Во многих исследованиях была обнаружена обратная зависимость между числом CAG-повторов в гене АR и его активностью.  Выявлено, что короткие аллели с числом повторов менее 22  связаны с активацией рецептора, а наличие большого числа повторов (>22) связано с инактивацией гена.  Была показана связь коротких аллелей гена AR, сопряженных с его высокой активностью, с нормальными уровнями тестостерона. Это дает основание предположить, что избыточное влияние андрогенов при СПКЯ может быть связано не только с их повышенной продукцией и гиперандрогенемией, но и с активацией AR при нормальных уровнях тестостерона в сыворотке крови. Подобный механизм может лежать в основе формирования так называемого неандрогенного фенотипа СПКЯ.

Определение предэкспансии в гене FMR1. Преждевременная недостаточность яичников ─ клинический синдром, определяемый как потеря функции яичников у женщин в возрасте моложе 40 лет. Он  характеризуется  нарушением менструального цикла, повышением уровня гонадотропинов  и снижением уровня эстрадиола. Клиническими проявлениями являются аменорея/олигоменорея, бесплодие  и  симптомы дефицита эстрогенов. Причины первичной яичниковой недостаточности (ПЯН) в 25% случаев генетические: происходит увеличение количества CGG-повторов в промоутере гена FMR1 (оно выявляется у 6% пациентов с этим диагнозом).  Данный ген кодирует белок FMRP.  В норме количество CGG  повторов составляет менее 45.  Увеличение их числа (то есть экспансия)  в диапазоне 45-59 расценивают как «серую зону», которая клинически никак не проявляется. При увеличении числа повторов от 60 до 200 отмечается состояние премутации FMR1, которая может стать причиной развития синдрома ПЯН. Полная мутация возникает при  возрастании  числа повторов больше 200. Носительство данной экспансии у женщин может вызывать ПЯН и синдром ломкой Х-хромосомы в легкой форме.

Показания к назначению

• Дифференциальная диагностика бесплодия;
• Дифференциальная диагностика причин нерегулярного цикла;
• Дифференциальная диагностика причин яичниковой недостаточности;
• Диагностика причин гиперандрогенемии;
• Выявление наследственных форм синдрома поликистоза яичников (СПКЯ);
• Выявление форм синдрома поликистоза яичников с повышенной чувствительностью андрогенового рецептора;
• Подозрение на первичную яичниковую недостаточность (ПЯН), ассоциированную с синдромом ломкой Х-хромосомы;
• Планирование семьи.

Интерферирующие факторы

Нет

Причины отклонения показателей от нормы (повышенные значения)

Интерпретация исследования инактивации Х-хромосомы:

Отрицательный результат исследования говорит о случайной инактивации X-хромосомы, то есть о равновесном и симметричном метилировании второй X-хромосомы у женщин, что позволяет исключить одну из генетических причин нарушений репродуктивных функций у таких пациенток.
Обнаружение сдвига инактивации X-хромосомы более 65% свидетельствует о нарушении процессов метилирования половых хромосом у женщин, что может приводить к различным нарушениям репродуктивной функции и развитию симптомокомплекса гиперандрогении.
Случайная активация X-хромосомы позволяет исключить одну из генетических причин нарушений репродуктивной функции у женщин, однако не противоречит диагнозу бесплодие, первичная яичниковая недостаточность, гиперандрогения.

Интерпретация изучения количества CAG-повторов в гене андрогенового рецептора:

Отрицательный результат исследования длины вариабельного фрагмента гена AR с большой вероятностью свидетельствует о нормальной восприимчивости рецепторов к андрогенам.
X-взвешенное биалелльное среднее значение CAG-повторов гена AR ниже 22 предрасполагает к повышению активности андрогенового рецептора, а менее 20 - с высокой долей вероятности прогнозирует наличие у женщины симптомов гиперандрогении.
Положительный результат теста определение X-взвешенного биалелльного среднего значения CAG-повторов вариабельного региона гена AR повышает вероятность гиперандрогении у пациентки, но не является диагностическим. Для постановки диагноза гиперандрогения или СПКЯ тестирование рекомендовано оценивать в совокупности с биохимическими исследованиями и клиническими данными при участии лечащего врача.

Интерпретация определения предэкспансии в гене FMR1:

5-45 - нормальная аллель
Диагноз первичной яичниковой недостаточности, ассоциированной с синдромом ломкой Х-хромосомы, исключен.
45-59 - умеренное увеличение, «серая зона»    
Диагноз первичной яичниковой недостаточности, ассоциированной с синдромом ломкой Х-хромосомы, исключен. Есть риск развития ПЯН у дальних родственников.
60-199 - премутация    
Повышенный риск развития первичной яичниковой недостаточности, ассоциированной с синдромом ломкой Х-хромосомы. Риск развития синдрома Мартина-Белла у потомков мужского пола.
>200    
Повышенный риск развития первичной яичниковой недостаточности, ассоциированной с синдромом ломкой Х-хромосомы. Риск развития синдрома Мартина-Белла у потомков мужского пола.

Причины отклонения показателей от нормы (сниженные значения)

—

Метод:

Диагностический фрагментный анализ (MLPA);

Анализатор:

Генетический анализатор Applied Biosystems 3500/3500xl, Thermo Fisher Scientific, США;

Аналитическая чувствительность тест-системы:

100%

Аналитическая специфичность тест-системы:

100%